闭经只是一种症状，诊断时首先需要寻找引起闭经的原因，即下丘脑-垂体-卵巢轴的调节失常发生在哪一环节，然后再确定是何种疾病所引起。需要注意除外妊娠引起的生理性闭经。应详细询问病史、体查和盆腔检查，然后依次逐步进行下列诊断性检查：

　　1．孕激素试验是评估内源性雌激素水平的简单、快速方法。

　　黄体酮每日肌肉注射lOmg，连续5天；或口服安宫黄体酮，每日l0～20mg，连用5天。如在停药后3～7日出现撤药出血为阳性反应，提示子宫内膜已受一定水平的雌激素影响，呈增殖期变化，外源性孕激素使其在增殖期变化的基础上发生分泌期变化，停药后内膜剥脱而出血。若孕激素试验无撤药出血称阴性反应，说明患者体内雌激素水平低下，以致对孕激素无反应，应进一步作雌激素试验。

　　2．雌激素试验

　　患者每晚睡前口服己烯雌酚2mg，连续20～22日或用苯甲酸雌二醇，隔日肌注2mg，共10次，为使停药后子宫内膜脱落完全，较后5日加用安宫黄体酮，每日口服10mg，停药后3～7日发生撤药出血为雌激素试验阳性，提示子宫内膜功能正常，对雌激素有反应，闭经是由于患者体内雌激素水平低落所致，应进一步寻找原因。无撤药出血为试验阴性，则应重复一次雌激素试验，若仍无出血，提示子宫内膜有弊端或被破坏，可诊断为子宫性闭经。

　　3．垂体功能检查

　　雌激素试验阳性提示患者体内雌激素水平低落，为确定原发病因是在卵巢、垂体或下丘脑，需作以下检查：

　　（1）血FSH、LH、PRL放射免疫测定：育龄妇女PRL正常值为0～14μg／L，PRL＞25μg／L时称高催乳激素血症，PRL升高时应进一步作头颅垂体X线摄片或CT检查，以排除垂体肿瘤。月经周期中FSH正常值为5～20u／L，LH为5～25u／L．若FSH＞40u／L，提示卵巢功能衰竭；若LH＞25u／L，高度怀疑为多囊卵巢；若FSH、LH均＜5u／L，提示垂体功能减退，病变可能在垂体或下丘脑。FSH和LH升高、E2低，提示卵巢功能低下。

　　（2）垂体兴奋试验：典型方法：将LHRH l00μg溶于生理盐水50ml中，30秒钟内静脉注射完毕。注射前及注射后130、60及120分钟分别采取2ml静脉血，用放射免疫或其他方法测定LH含量。若注射后15～60分钟LH值较注射前高2～4倍以上，说明垂体功能正常，对LHRH反应良好，病变在下丘脑；若经多次重复试验，LH值仍无升高或增高不明显，提示病变在垂体。疑垂体肿瘤时应作蝶鞍X线摄片检查或CT检查：疑闭经与性分化异常有关、作染色体检查。疑与肾上腺皮质功能异常有关、查24小时尿17酮及l7羟类固醇或血皮质醇等。

　　4．激素测定：包括女性激素、甲状腺激素和肾上腺激素。

　　5．影像学检查：包括B超，子宫输卵管造影、CT、MRI等。

　　6．宫腔镜检查。

　　7．专业设备检查。

　　8．性染色体检查。